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知識(shí)講解:ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽(yáng)性和空白對(duì)照的重要作用

更新時(shí)間:2024-07-25    點(diǎn)擊次數(shù):3187

  知識(shí)講解:ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽(yáng)性和空白對(duì)照的重要作用

 

  ELISA檢測(cè),要求嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)要求,每次試驗(yàn)、每塊扳上都要設(shè)置以下3項(xiàng)對(duì)照和用途下面我司技術(shù)為您詳細(xì)介紹ELISA實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性、陽(yáng)性和空白對(duì)照的作用:

  1.空白對(duì)照:僅用稀釋液代替檢測(cè)樣本、用以觀測(cè)zui終反應(yīng)的顯色“本底"、并用于酶標(biāo)儀消除、扣除“本底",即:以本底為“零"讀取陽(yáng)性、陰性對(duì)照孔和樣本檢測(cè)孔的吸光值(A);或者,在計(jì)算陰性對(duì)照均值(NCx)、陽(yáng)性對(duì)照均值(PCx)、樣本讀數(shù)的S/C.O.值時(shí)減去空白對(duì)照的本底吸光值。

  2.陰性對(duì)照(品):所謂陰性對(duì)照(品),應(yīng)當(dāng)是本項(xiàng)檢測(cè)試驗(yàn)中采用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質(zhì)性,又不含有待檢物質(zhì),并能客觀比較和鑒別處理因素(血清免疫學(xué)試驗(yàn)中有特異性抗原與抗體反應(yīng))之間的差異。

  3.陽(yáng)性對(duì)照(品):

  (1)陽(yáng)性對(duì)照(品)的概念與要求:同陰性對(duì)照(品),只是采用“精選"的含有待檢物質(zhì)的人血清制備而成。所謂“精選",就是把收集的陽(yáng)性人血清經(jīng)過(guò)數(shù)種試驗(yàn)進(jìn)行“篩試"、把含有“干擾性物質(zhì)"的血清剔除、不用,以避免出現(xiàn)“假陽(yáng)性"干擾試驗(yàn)結(jié)果。

  (2)陽(yáng)性對(duì)照(品)設(shè)置,也可區(qū)分為兩種類(lèi)型與用途:

  一是陽(yáng)性對(duì)照主要用于評(píng)價(jià)該項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性。而所設(shè)的陽(yáng)性對(duì)照的測(cè)量值不列入Cut off值計(jì)算、但是不可不做。如HBsAg、抗—HBs、HBeAg等。

  二是陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置,不僅用于評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果是否有效和試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可比性,而且計(jì)入Cut off的計(jì)算。此時(shí)的Cut off值的含義是代表該標(biāo)志物在健康(正常)人群中正常值范圍的上限。待檢樣本檢測(cè)值超過(guò)該上限(Cut off)時(shí)表示有診斷意義。

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