Elisa試劑盒標準品稀釋液及樣品準備

　　以下是ELISA試劑盒標準品稀釋液及樣品準備的規(guī)范流程和注意事項：

　　一、標準品稀釋液制備?

　　稀釋液選擇原則?

　　血清/血漿/組織勻漿樣本：使用試劑盒配套的標準品稀釋液(通常含1% BSA的PBS)

　　細胞上清樣本：建議用細胞培養(yǎng)基稀釋以保持基質(zhì)一致性

　　配制方法?

　　10×濃縮液按1:9比例用1× PBS(pH 7.2-7.4)稀釋為工作液

　　現(xiàn)配現(xiàn)用，避免長期儲存導致成分沉淀或變質(zhì)

　　標準品稀釋步驟：

　　二、標準品溶解與稀釋?

　　溶解步驟?

　　凍干標準品離心后，沿管壁緩慢加入稀釋液，靜置15分鐘再輕柔混勻

　　避免直接吹打，防止蛋白變性或損失

　　梯度稀釋操作?

　　倍比稀釋法?：每管加入等體積稀釋液(如250μL)，逐級稀釋(S7至S0)

　　混勻技巧?：溫和顛倒5-8次或低速彈撥管底，避免渦旋

　　三、樣品準備關(guān)鍵點?

　　樣本類型? ?處理要求?

　　血清/血漿? 離心后立即分裝(-20℃保存)，避免反復凍融;檢測前用稀釋液預稀釋(通常1:2起)

　　組織勻漿? 裂解后離心取上清，用稀釋液調(diào)整蛋白濃度至檢測范圍內(nèi)

　　細胞上清? 直接檢測或按需稀釋(根據(jù)預估濃度)，避免含F(xiàn)BS干擾

　　四、注意事項?

　　鉤狀效應驗證?：高濃度樣本需梯度稀釋，觀察OD值是否隨稀釋倍數(shù)增加而升高

　　分裝保存?：標準品溶解后建議分裝凍存(-80℃)，避免反復凍融

　　環(huán)境控制?：稀釋操作在25±2℃下進行，避免溫度波動影響蛋白穩(wěn)定性

　　注：具體稀釋倍數(shù)需根據(jù)試劑盒說明書及預實驗結(jié)果調(diào)整。

　　注：以上資料僅供參考，具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應商。

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