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如何正確進行ELISA試劑盒的洗滌步驟?

更新時間:2025-09-08    點擊次數(shù):72

  如何正確進行ELISA試劑盒的洗滌步驟?

  ELISA試劑盒洗滌步驟操作指南?

  一、洗滌次數(shù)與方式?

  常規(guī)洗滌次數(shù)?

  每次孵育(如抗原/抗體結(jié)合、酶標物反應(yīng))后需洗滌 ?3-5次?,以去除未結(jié)合物質(zhì)并降低背景干擾?。

  若背景值高,可增加至5次洗滌;若信號弱,減少至3次?。

  洗滌方法?

  手工洗板?:

  每孔加入洗滌液(如PBST)至滿孔,靜置1-2分鐘,吸干后拍干?。

  避免用力過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫落?。

  洗板機洗板?:

  確保酶標板平整,避免洗液殘留?。


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  二、關(guān)鍵操作細節(jié)?

  洗滌液配置?

  使用新鮮配制的洗滌液(如1×PBST),避免放置過久產(chǎn)生絮狀物?。

  若洗滌液結(jié)晶,需37℃加熱溶解后稀釋?。

  溫度與時間控制?

  洗滌液溫度建議保持在20-30℃,避免低溫導(dǎo)致“花板"現(xiàn)象?。

  每次浸泡時間需≥1分鐘,確保充分洗滌?。

  拍干技巧?

  使用一次性吸水紙垂直拍干,避免交叉污染?。

  酶標板拍干后需立即進行下一步操作,防止干燥導(dǎo)致信號減弱?。

  三、常見問題與解決方案?

  “花板"現(xiàn)象?:

  可能原因:洗滌不凈、板不平整或孵育時間過長?。

  解決:增加洗滌次數(shù)、檢查板平整度、控制孵育時間?。

  高背景值?:

  可能原因:洗滌液失效或拍干不凈?。

  解決:更換新鮮洗滌液、需要拍干?。

  注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據(jù),具體產(chǎn)品說明請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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