ELISA板的基本使用流程

　　ELISA板(酶標(biāo)板)是ELISA實驗的核心載體，其使用需遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，主要包括以下步驟：

　　板條拆裝與保存?

　　使用可拆卸酶標(biāo)板時，輕推底部拆下所需板條，剩余板條需密封后4℃保存(避免干燥失效)?。

　　未使用的板條應(yīng)連同干燥劑放回鋁箔袋，密封保存于4℃冰箱?。

　　樣本與標(biāo)準(zhǔn)品處理?

　　樣本需離心(4℃, 1000g, 5分鐘)去除雜質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)品需稀釋為梯度濃度(如1:2倍比稀釋)?。

　　加樣時每孔100μL，懸空加入避免氣泡，不同濃度需更換槍頭?。

　　孵育與洗滌?

　　加樣后37℃避光孵育90分鐘，孵育時間需嚴(yán)格控制?。

　　洗滌時每孔加入300μL洗滌液，浸泡30秒后拍干，重復(fù)3-5次以減少背景信號?。

　　顯色與檢測?

　　加入底物(如TMB)避光孵育15分鐘，終止反應(yīng)后立即用酶標(biāo)儀450nm檢測OD值?。

　　關(guān)鍵注意事項

　　封閉?：包被后需用BSA或脫脂奶粉封閉非特異性結(jié)合位點，減少假陽性?。

　　溫度控制?：孵育溫度需穩(wěn)定(37℃)，避免溫度波動影響結(jié)合效率?。

　　洗滌?：洗滌不充分會導(dǎo)致高背景值，建議使用洗板機或手動拍干?。

　　常見問題與優(yōu)化

　　板條選擇?：優(yōu)先選用聚苯乙烯材質(zhì)微孔板，吸附性能穩(wěn)定且空白值低?。

　　加樣技巧?：避免加在孔壁上部，防止液體殘留影響結(jié)果?。

　　重復(fù)性?：建議設(shè)置復(fù)孔(至少3次重復(fù))以提高數(shù)據(jù)可靠性?。

　　如需更詳細的視頻操作演示，可參考ELISA實驗教程?。

　　注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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