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關(guān)于ELISA方法如何檢測(cè)帶抗體的相關(guān)指標(biāo)
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù),廣泛應(yīng)用于抗體相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)。以下是本生對(duì)其核心方法及原理:
一、ELISA檢測(cè)抗體的主要方法
間接法
將已知抗原包被在固相載體上,加入待測(cè)樣本后,若樣本含目標(biāo)抗體,則與抗原結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的二抗(如抗人IgG),通過顯色反應(yīng)檢測(cè)抗體水平。該方法靈敏度高,常用于病原體抗體檢測(cè)。
競(jìng)爭(zhēng)法
適用于小分子抗體或半抗原檢測(cè)。樣本中的抗體與酶標(biāo)抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗原,顯色強(qiáng)度與抗體濃度成反比。例如,藥物殘留分析中檢測(cè)瘦肉精抗體。
捕獲法
專用于IgM抗體檢測(cè)(如早期傳染病診斷)。先用抗人IgM抗體捕獲血清中的IgM,再加入特異性抗原和酶標(biāo)二抗。
二、技術(shù)原理與優(yōu)勢(shì)
原理:通過酶標(biāo)記放大信號(hào),顯色反應(yīng)強(qiáng)度與抗體濃度成正比,實(shí)現(xiàn)定量或定性分析。
優(yōu)勢(shì):靈敏度高(可檢測(cè)pg/mL級(jí)抗體)、特異性強(qiáng)(基于抗原-抗體結(jié)合)、操作簡(jiǎn)便(適合批量檢測(cè))。
三、應(yīng)用場(chǎng)景
自身免疫病:檢測(cè)類風(fēng)濕因子、抗核抗體等,輔助診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
科研與生產(chǎn):抗體制備中篩選單克隆抗體,或評(píng)估疫苗免疫效果。
四、注意事項(xiàng)
樣本要求:避免溶血或脂血干擾,需規(guī)范采集靜脈血。
結(jié)果解讀:需結(jié)合臨床癥狀,假陽(yáng)性可能由感染或藥物引起。
方法選擇:大分子抗體(如IgG)優(yōu)先用間接法,小分子抗體(如藥物抗體)用競(jìng)爭(zhēng)法。
ELISA方法通過靈活的設(shè)計(jì)(如間接法、競(jìng)爭(zhēng)法)可滿足不同抗體檢測(cè)需求,是臨床和科研中的工具。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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